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#PCR实验室整体规划与仪器的配套设施

  • 发布时间:2020-05-18
  • 发布者: admin
  • 来源: 本站
  • 阅读量:6


目前,国内的二级医院基本上都在积极开展基因扩增检查实验室项目,PCR实验室的设计与建设越来越受到医学界的重视。根据实验流程,房间功能分别为样品准备区,标本制备区,基因增扩区,物产分析区几个区域,规范对此区域没有洁净度的要求,如果此区域采用空调净化,可以采用十万级净化洁净度。


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                                                                                                                                                                             今天首先为大家介绍一下

详情和概况

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实验室空调通风系统设计及压力控制

PCR实验室并没有严格的净化等级要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

 试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染,可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。

(1)试剂贮存和准备区

该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压力的控制,本区应对外界保持微正压。

(2)标本制备区

该区域主要进行的操作为样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。

(3)扩增和扩增产物分析区

该区域主要进行的操作为DNA扩增和扩增片段的测定。此外,已制备的DNA模板(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。

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PCR实验室设计建设中容易出现的问题

1、PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行,防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。需要严格的通风设计,若通风设计不合理,会使风速流向混乱,甚至危害人们健康。

2、人流路径与物流路径设计不合理

进入实验室区域工作人员应该按照以下路径:

公共清洁区——更衣间(更换洁净服)——缓冲间——污染实验区

工作人员退出实验室的路径为:

污染试验区——缓冲间——淋浴间(有条件的可设置)——更衣间——公共清洁区



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                                                                                                 常压PCR实验室设计

若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。



理想的PCR实验室——设置缓冲间

PCR走廊—缓冲间—试剂准备区—样本提取区—PCR扩增区—检测分析区—数据处理区—废弃物通道

应对新冠(类似)病毒检测的PCR实验室设计方案

1、采用全送全排的气流组织形式,严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

2、严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行,防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。

3、在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。

4、使用荧光定量PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。

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建设重点





设计依据

1新型冠状病毒肺炎应急救治设施设计导则(卫健委发布)
2新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版,卫健委发布)
3实验室生物安全手册(WHO第三版)
4生物安全实验室建筑技术规范(GB 50346-2011)
5实验室生物安全通用要求( GB19489-2008 )
6科研建筑设计标准(JGJ91-2019)
7医院负压隔离病房环境控制要求(GBT 35428-2017 )
8病原微生物实验室生物安全通用准则WS 233―2017
9临床实验室生物安全指南WST 442-2014

完备的实验室配套设施

完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净工作台、离心机、加样器等。

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